Transendo-/epitheliale Rekrutierung von Monozyten in die Lunge : Phänotypische und funktionelle Charakterisierung

Abstract

Die Funktion von alveolär rekrutierten Monozyten im inflammatorischen Geschehen der Lunge ist bisher weitestgehend ungeklärt, da diese Zellpopulation nicht von residenten Alveolarmakrophagen differenziert werden konnte. Die intravenöse Applikation des rotfluoreszenten in vivo Farbstoffes PKH26, welcher dosis- und zeitabhängig in residenten Alveolarmakrophagen akkumulierte ohne Blutleukozyten anzufärben, erlaubte eine klare Identifikation, Isolierung und Funktionsanalyse von alveolär rekrutierten Monozyten im Mausmodell. Die intraalveoläre Deposition des Chemokins JE/MCP-1 bewirkte einen Einstrom von Monozyten in den Alveolarraum von Mäusen, welche mittels bronchoalveolärer Lavage gewonnen und der durchflußzytometrischen Differenzierung von residenten Alveolarmakrophagen und Lymphozyten sowie der Separation und funktionellen Analyse zugeführt werden konnten. Die Analyse des Antigenprofils zeigte, dass alveolär rekrutierte Monozyten nach Transmigration für mindestens 96h den Phänotyp von peripheren Blutmonozyten bezüglich des Monozyten/Makrophagen-Markers F4/80 sowie der Adhäsionsmoleküle CD11a, CD11b, CD18, CD49d und CD62L beibehielten. Monozyten nach transendo-epithelialer Migration zeigten jedoch eine signifikante Hochregulation des LPS/LBP-Rezeptors CD14, einhergehend mit einer signifikant erhöhten baseline TNF -mRNA und einer vierfach erhöhten TNF -Proteinsekretion nach Endotoxinstimulation. Diese Beobachtung kann als transmigrations-assoziiertes 'Priming' alveolär rekrutierter Monozyten zur Unterstützung der pulmonalen Host-defense im Kontext der akuten pulmonalen Inflammation interpretiert werden.