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    Effect of recombinant fibroblast growth factor 10 on the lung vasculature in a mouse model of bronchopulmonary dysplasia
    (2025) Gersmann, Luisa
    There is strong evidence for the essential role of FGF10 during lung development. However, little is known about its concrete effect on the vascular system and the contribution of pulmonary vasculature to the pathogenesis of BPD. We aimed to study the impact of rFGF10 on the vasculature of the lung in a mouse model of BPD, to gain new information about underlying mechanisms and related pathologies such as BPD-PH. To demonstrate the effect of hyperoxia-induced lung injury, we exposed two experimental groups to hyperoxia (HYX) (PN1-PN8) followed by several intraperitoneal injections of PBS or rFGF10 until PN42. In the following experiments, we compared these groups to a control group held under normoxic conditions (NOX). Before lung harvest on PN45, we performed lung function and echocardiographic measurements to study organ function indices. We found strong indications for impaired right ventricular function represented by high TAPSE values in the HYX PBS group, suggesting an increased pressure of the pulmonary vascular system connected downstream of the right ventricle of the heart. The HYX FGF10 group showed a normalization of all studied indices in the functional experiments. Afterward, we collected lungs for further analysis involving RT-qPCR, immunostainings, and vascular morphometry after a double staining with ACTA2 and vWF. In summary, we found increased expression of Vegfa and its receptor Vegfr2 in the qPCR after rFGF10 treatment. The vascular morphometry revealed a rarefication of vessels in the distal areas of the lung after exposure to hyperoxia and regeneration after rFGF10 treatment. Furthermore, we were able to demonstrate an increased percentage of fully muscularized vessels towards a PH-phenotype after HYX lung injury and normalization after rFGF10 treatment in the periphery of the lung. Our results provide evidence for the affection of the pulmonary vasculature in a mouse model of BPD and the beneficial effects of rFGF10 treatment at a late stage of lung development. We found improved organ function, upregulated expression of pro-angiogenic genes and normalized histological features in the HYX FGF10 group compared to the HYX PBS group. In conclusion, this study reveals important information about changes of the pulmonary vasculature after hyperoxic lung injury at PN45, which represents young adulthood of the mice. We were able to partly reverse the damage described with our rFGF10 treatment. These findings might be crucial in developing targeted therapies to prevent or treat BPD and associated vascular comorbidities in prematurely born infants.
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    Household expectations and dissent among policymakers
    (2025) Grebe, Moritz; Tillmann, Peter
    This paper studies the impact of dissent in the ECB’s Governing Council on uncertainty surrounding households’ inflation expectations. We conduct a randomized controlled trial using the Bundesbank Online Panel Households. Participants are provided with alternative information treatments concerning the vote in the Council, e.g. unanimity and dissent, and are asked to submit probabilistic inflation expectations. The results show that the vote is informative. Households revise their subjective inflation forecast after receiving information about the vote. Information about unanimity or dissent causes a wider individual distribution of future inflation for those households that were relatively certain before the treatment. For the remaining 60% of households, this information reduces uncertainty. Information about dissent increases uncertainty more than information about a unanimous vote, though the difference is not statistically significant. A unanimous vote unambiguously reduces inflation uncertainty for households with anchored inflation expectations.
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    Bakterielle Expression eines codon-optimierten Flotillin-1-Fusionsproteins
    (2025) Shams Ashaghi, Negin
    Das humane Flotillin-1-Protein ließ sich bislang in Prokaryoten nicht gut exprimieren. Der Grund könnte die unterschiedliche Codonbenutzung in Pro- und Eukaryoten sein. Um für Forschungszwecke mehr lösliches Flotillin-1 als GST-Fusionsprotein zu gewinnen, war das Ziel dieser Arbeit „codon-optimierte“ Flotillin-1 Expressionsplasmide zu generieren, diese hinsichtlich Expression und Kulturbedingungen zu untersuchen und zu optimieren, sodass die höchstmögliche Proteinausbeute geschaffen wird. Dabei sollten, nach Optimierung des Leserasters des humanen Flotillin-1 für die bakterielle Expression, die Parameter Temperatur, Induktionszeit und -konzentration untersucht und optimiert, sowie die Expression des optimierten Flot-1-GST Fusionsproteins mit der nicht optimierten Sequenz verglichen werden. Für die Expressionsversuche wurde das codon-optimierte Flotillin-1 als GST-Fusion in den Vektor pGEX-4T-1 kloniert. Nach ersten Expressionsversuchen mit einer 0,2 mM IPTG-Induktion über Nacht und bei Raumtemperatur in den dafür geeigneten kompetenten Zellen BL21, konnte mittels SDS-Gelelektrophorese und Western Blot das expressionsstärkste Klon detektiert werden. Mit diesem wurden alle folgenden Versuche durchgeführt. Es wurden lediglich Vorversuche durchgeführt, um zunächst eine Tendenz zu ermitteln, ob die Optimierung gewinnbringend ist. Als Wirte für das Fusionsprotein dienten BL21-Zellen, nachdem zwischen der Expression in Rosetta DE3 und BL21 DE3 kein deutlicher Unterscheid festgestellt werden konnte. Das humane Flotillin-1 wurde in Rosetta DE3-Zellen exprimiert. Im Rahmen der Expressionsversuche konnte festgestellt werden, dass die IPTG-Konzentration keinen ausschlaggebenden Unterschied bei der Proteinexpression zeigte. Die Untersuchung der Induktionstemperatur konnte aber recht deutlich zeigen, dass die optimale Temperatur zwischen 21°C und 24°C liegt. Was den Vergleich des optimierten mit dem nicht-optimierten Flotillin-1 angeht, so konnte festgestellt werden, dass das optimierte Protein zwar etwas länger braucht, jedoch am Ende das expressionsstärkere Protein ist. Besonders in großen Mengen kann das optimierte Flotillin-1 durchaus von Vorteil sein, jedoch bringt das nicht-optimierte Flotillin-1 auch gute und zufriedenstellende Ergebnisse bei optimierten Expressionsbedingungen (Temperatur, IPTG-Konzentration und Zeit).