Show simple item record

dc.contributor.authorFuchs, Uta
dc.date.accessioned2023-03-03T14:40:19Z
dc.date.available2002-11-10T23:00:00Z
dc.date.available2023-03-03T14:40:19Z
dc.date.issued2002
dc.identifier.urihttp://nbn-resolving.de/urn:nbn:de:hebis:26-opus-8486
dc.identifier.urihttps://jlupub.ub.uni-giessen.de//handle/jlupub/10569
dc.identifier.urihttp://dx.doi.org/10.22029/jlupub-9952
dc.description.abstractLeukämien sind die häufigsten Krebserkrankungen im Kindesalter. Sie entstehen in den meisten Fällen aufgrund von chromosomalenTranslokationen, die die Struktur und normale Funktion von Genen verändern, die in der gesunden Zelle Proliferations- undDifferenzierungsprozesse kontrollieren. Ein wiederholt bei akuten myeloischen und lymphatischen Leukämien betroffener Locus ist dasMLL-Gen auf Chromosom 11q23. Bislang sind über 40 verschiedene Translokationen unter MLL-Beteiligung identifiziert worden. Allemolekular charakterisierten Translokationen zeigten, dass sie zur Entstehung von Fusionsproteinen aus einem N-terminalen MLL-Anteil undeinem C-terminalen Partnergenanteil führen. Ziel dieser Arbeit war es, die kürzlich identifizierten MLL-Fusionspartner GRAF und FBP17 molekulargenetisch zu charakterisieren. DerGRAF-Promotor wurde mittels Reportergenassays auf regulative Elemente hin untersucht, und mit Hilfe des Yeast One Hybrid Systemswurde nach Bindungsproteinen in Promotorbereichen gesucht. Mittels quantitativer real-time PCR wurde der Einfluss derDNA-Methylierung und Histon -Acetylierung auf die GRAF-Expression bestimmt. Darüber hinaus wurde die Wirkung des GRAF-Proteinsauf verschiedene Signaltransduktionswege getestet. Schließlich erfolgte mit dem Yeast Two Hybrid System eine Suche nach potenziellenInteraktionspartnern des GRAF- und FBP17-Proteins. Es konnte gezeigt werden, dass der GRAF-Promotor methylierungssensitive Bereiche enthält. Behandlung mit demethylierendenReagenzien führte zu einer Steigerung der GRAF-Expression in 3 von 5 untersuchten Zelllinien, induzierte Hyperacetylierung steigerte dieExpression in allen 5 Leukämiezelllinien. Expression des GRAF-Proteins in transfizierten Zellen führte zu einer Aktivierung der JNK- undNFk B-Signaltransduktionswege. Die GRAF-Interaktionspartner (z.B. FAK2) lassen eine Verbindung des Proteins zumIntegrin-Signaltransduktionsweg vermuten und damit auch zur RAS-vermittelten Proliferationsregulation. FBP17 interagiert mit dem Sorting Nexin SNX2 und Tankyrase, wobei die Interaktion mit Tankyrase spezifisch von der SH3-Domäne vonFBP17 vermittelt wird. FBP17 könnte so eine integrierende Funktion erfüllen, die den SNX2-vermittelten endosomalen Proteintransport mitstrukturellen und regulativen Fähigkeiten der an den Golgi-Apparat gebundenen Tankyrase verknüpft.de_DE
dc.description.abstractLeukaemia is the most recurrent cancer type in childhood. In most cases the disease arises from chromosomal translocations which impairthe structure and normal function of genes normally involved in the control of cellular proliferation and differentiation. A repeatedly affectedlocus in cases of acute myeloid leukaemia as well as acute lymphoid leukaemia is the MLL-gene at chromosome 11q23. To date morethan 40 different translocations have been identified in which MLL took part. All molecularly characterised translocations showed that theylead to the expression of fusion proteins consisting of a N-terminal MLL-part and a C-terminal partner gene contribution. The aim of this study was the molecular characterisation of the lately identified MLL fusion partners GRAF and FBP17. The GRAF promoterwas analysed for regulative elements using reporter gene assays. For binding proteins in the promoter region has been searched by YeastOne Hybrid screens. The influence of DNA methylation and histone acetylation on the GRAF expression has been studied by quantitativereal time PCR. Apart from that the influence of the GRAF protein on several signal transduction pathways has been examined. Finallypotential interaction partners of GRAF have been identified using the Yeast Two Hybrid system. It could have been shown that the GRAF promoter contains methylation sensitive regions. treatment with demethylating reagents led to theenhancement of GRAF expression in 3 of 5 cell lines examined, induced hyperacetylation enhanced the expression in all 5 cell lines. GRAFprotein expression led to the activation of JNK and NFk B mediated signal transduction pathways. The GRAF interaction partners (e.g.FAK2) presume a connection of the protein to the integrin signal transduction pathway and therewith to the RAS mediated regulation ofproliferation. FBP17 interacts with the Sorting Nexin SNX2 and Tankyrase. The interaction with Tankyrase is specifically mediated by the SH3 domain ofFBP17. Thus FBP17 could possess an integrating function connecting the SNX2 mediated endosomal protein transport to structural andregulative capabilities of the Golgi connected Tankyrase.en
dc.language.isode_DEde_DE
dc.rightsIn Copyright*
dc.rights.urihttp://rightsstatements.org/page/InC/1.0/*
dc.subject.ddcddc:570de_DE
dc.titleCharakterisierung der 11q23/MLL-Fusionspartnergene GRAF und FBP17de_DE
dc.typedoctoralThesisde_DE
dcterms.dateAccepted2002-10-22
local.affiliationFB 08 - Biologie und Chemiede_DE
thesis.levelthesis.doctoralde_DE
local.opus.id848
local.opus.instituteInstitut für Biochemiede_DE
local.opus.fachgebietBiologiede_DE


Files in this item

Thumbnail

This item appears in the following Collection(s)

Show simple item record

In Copyright