Evaluierung und Anwendung neuartiger enzymimmunologischer Verfahren für Mutterkornalkaloide in Lebensmitteln
| dc.contributor.author | Roloff, Lydia | |
| dc.date.accessioned | 2023-03-08T17:43:14Z | |
| dc.date.available | 2010-06-08T10:58:34Z | |
| dc.date.available | 2023-03-08T17:43:14Z | |
| dc.date.issued | 2010 | |
| dc.identifier.isbn | 978-3-8359-5591-2 | |
| dc.identifier.uri | http://nbn-resolving.de/urn:nbn:de:hebis:26-opus-76268 | |
| dc.identifier.uri | https://jlupub.ub.uni-giessen.de//handle/jlupub/13023 | |
| dc.identifier.uri | http://dx.doi.org/10.22029/jlupub-12406 | |
| dc.description.abstract | Diese Arbeit beschreibt den Nachweis von Mutterkornalkaloiden (Ergotalkaloiden) aufimmunchemischer Basis. Hierzu wurden polyklonale Antikörper gegen verschiedeneErgotalkaloide eingesetzt bzw. hergestellt. Als Referenzmethode zur Methodenprüfung sowiezur Prüfung des Toxinspektrums in Lebensmitteln wurde eine HPLC-Analytik für 14Ergotalkaloide eingesetzt (Ergometrin, Ergotamin, Ergocristin, alpha-Ergocryptin, alpha-Ergocryptin,Ergocornin, Ergosin sowie die sieben korrespondierenden -inin-Isomere). Unter Verwendungvon Antikörpern gegen Ergometrin (Ergonovin), Ergotamin, alpha-Ergocryptin und Ergocorninwurden kompetitive Enzymimmuntests erstellt und charakterisiert. Die Nachweisgrenzendieser Tests für das entsprechende Alkaloid lagen bei 0,03 ng/ml (Ergometrin), 0,2 ng/ml(Ergotamin), 1 ng/ml (alpha-Ergocryptin) bzw. 3 ng/ml (Ergocornin). Bezüglich der Testspezifitätzeigte sich, dass im Testsystem für Ergometrin alle 14 Ergotalkaloide erfassbar waren,während die anderen drei Testsysteme jeweils nur mit Teilgruppen kreuzreagierten. Auf derBasis der Antikörper gegen Ergometrin wurde ein gruppenspezifischer Nachweis fürErgotalkaloide etabliert und validiert. Mit diesem Generic Ergot Alkaloid Enzymimmuntestkonnte die Summenbelastung dieser Toxine in Getreide und Getreiderzeugnissen mit einerNachweisgrenze von 20 alpha g/kg (Brot 14 mü g/kg) bestimmt werden. DurchVergleichsuntersuchungen mit HPLC anhand natürlich kontaminierter Probenmaterialienkonnte die Anwendbarkeit dieses Testsystems demonstriert werden. Unter Verwendung desGeneric Ergot Alkaloid Enzymimmuntests wurden 223 getreidehaltige Lebensmittel desdeutschen Marktes untersucht. Roggen und daraus hergestellte Lebensmittel waren amhäufigsten belastet (77-91 %), die Medianwerte des Gesamtergotalkaloidgehalts lagenzwischen 45 mü g/kg und 152 mü g/kg. Weizen und daraus hergestellte Erzeugnisse warenseltener und in niedrigeren Konzentrationen belastet (9-28 %, Medianwerte<Nachweisgrenze). In Dinkel und Dinkelmehl waren Ergotalkaloide ebenfalls nachweisbar,jedoch in geringen Konzentrationen. Das in dieser Arbeit entwickelte Verfahren (GenericErgot Alkaloid Enzymimmuntest) eignet sich somit zum einfachen, schnellen undempfindlichen Routinenachweis von Ergotalkaloiden in Getreide und verarbeitetenLebensmitteln. | de_DE |
| dc.description.abstract | This thesis describes the detection of ergotalkaloids based on immunochemical methods usingpolyclonal antibodies against ergot alkaloids.A high performance liquid chromatography procedure for 14 ergot alkaloids (ergometrine,ergotamine, ergocristine, alpha-ergocryptine, mü-ergocryptine, ergocornine, ergosine as well astheir corresponding inine-epimers) was used as the reference method to validate theimmunochemical method and to test the toxin spectrum in foods.Using antibodies against ergometrine (ergonovine), ergotamine, alpha-ergocryptine andergocornine competitive enzyme immunoassays were established and validated.The limit of detection of these assays was 0.03 ng/ml for ergometrine, 0.2 ng/ml forergotamine, 1 ng/ml for alpha-ergocryptine and 3 ng/ml for ergocornine, respectively.Concerning the specificity of the immunoassays, the results demonstrated that the testingsystem for ergometrine could detect all of the 14 ergot alkaloids, whereas the other threesystems cross reacted only with some of the 13 other ergot alkaloids.Adapted from the antibodies against ergometrine, a group specific method for thedetermination of ergot alkaloids was established and validated.Using this Generic Ergot Alkaloid enzyme immunoassay the exposure of the alkaloidtoxines in cereals and products of cereals could be determined at a limit of detection of20 mü g/kg (in bread: 14 müg/kg).The applicability of this immunochemical method could be demonstrated by comparative testsusing high performance liquid chromatography with naturally contaminated samples.Furthermore, the Generic Ergot Alkaloid enzyme immunoassay was applied to analyze 223grain-containing foods of the German market. Rye and products from rye were found to becontaminated most frequently (77-91 %), the medians of the total amount of ergot alkaloidswere arranged between 45 mü g/kg and 152 mü g/kg. Wheat and products from wheat were foundto be contaminated rarely, namely both quantitative (9-28 %) and qualitative (medians < thelimit of detection). In spelt and in flour from spelt ergot alkaloids could be detected, but theconcentration of these alkaloids was very low.Therefore, the Generic Ergot Alkaloid enzyme immunoassay is suitable for a simple, quickand sensitive every day analysis of ergot alkaloids in cereals and grain-containing foods. | en |
| dc.language.iso | de_DE | de_DE |
| dc.rights | In Copyright | * |
| dc.rights.uri | http://rightsstatements.org/page/InC/1.0/ | * |
| dc.subject.ddc | ddc:630 | de_DE |
| dc.title | Evaluierung und Anwendung neuartiger enzymimmunologischer Verfahren für Mutterkornalkaloide in Lebensmitteln | de_DE |
| dc.type | doctoralThesis | de_DE |
| dcterms.dateAccepted | 2010-04-20 | |
| local.affiliation | FB 10 - Veterinärmedizin | de_DE |
| thesis.level | thesis.doctoral | de_DE |
| local.opus.id | 7626 | |
| local.opus.institute | Institut für Tierärztliche Nahrungsmittelkunde | de_DE |
| local.opus.fachgebiet | Veterinärmedizin | de_DE |
| local.source.freetext | Giessen : VVB Laufersweiler 2010 | de_DE |
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