Stimulation of voltage-dependent Ca2+channels by NO at rat myenteric ganglia
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Im Rahmen dieser Arbeit wurde die Wirkung des nonadrenergen-noncholinergen Neurotransmitters Stickstoffmonooxid (NO) auf Zellen des Plexus myentericus der Ratte untersucht inklusive der Expression der Enzyme, die für die Produktion dieses Neurotransmitter verantwortlich sind. Myenterische Ganglien von 5 bis 12 Tage alten Ratten wurden enzymatisch isoliert und nach ca. 15 Stunden in Kultur mit dem Ca2+-Indikator Fura-2-AM beladen. Die intrazelluläre Ca2+-Konzentration ([Ca2+]i) wurde mit der Imaging Methode gemessen. Imaging Experimente zeigten, dass der NO Donor GEA 3162 (10-4 mol.l-1) einen signifikanten Anstieg der intrazellulären Calciumkonzentration verursachte. Dieser Anstieg ist durch Aktivierung spannungsabhängiger Ca2+-Kanäle verursacht, da der NO-Effekt in Abwesenheit von extrazellulärem Ca2+ oder nach Zugabe von Blockern von spannungsabhängigen Ca2+-Kanälen stark gehemmt war. Der Einfluss von GEA 3162 auf myenterische Zellen der Ratte scheint durch L- und N-Typ spannungsabhängige Ca2+-Kanäle vermittelt zu sein, denn die Hemmstoffe dieser Ca2+-Kanäle, Nifedipin bzw. w-Conotoxin, erwiesen sich als die wirksamsten, um den NO-bedingten Anstieg von ([Ca2+]i) zu vermindern. Polymerasekettenreaktions- (PCR-) und immunhistochemische Versuche wiesen die Existenz mehrerer Isoformen des Enzyms NO Synthase, nämlich der neuronalen Form (nNOS) und der endothelialen Form (eNOS), nach. Die dritte Isoform, die induzierbare NOS (iNOS), konnte nur mit immunhistochemischen Versuchen nach Stimulation der Ganglien mit dem proinflammatorischen Zytokin TNF-a nachgewiesen werden. Diese Versuche zeigen, dass NO unter physiologischen Bedingungen im Plexus myentericus gebildet werden kann.Link to publications or other datasets
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Giessen : VVB Laufersweiler 2009