Expression von Notch-Rezeptoren und ihren Liganden in der humanen Plazenta
Datum
Autor:innen
Betreuer/Gutachter
Weitere Beteiligte
Herausgeber
Zeitschriftentitel
ISSN der Zeitschrift
Bandtitel
Verlag
Lizenz
Zitierlink
Zusammenfassung
Fragestellung:Die Etablierung des Gefäßsystems in der Plazenta ist wichtig für diekomplikationslose Schwangerschaft und die Entwicklung von gesunden Feten.Verschiedene Knock-out-Maus-Modelle zeigten die essenzielle Rolle der Notch-Rezeptoren und deren Liganden in der Differenzierung der Gefäße. Um den Prozessder Vaskulo- und Angiogenese in der humanen Plazenta genauer zucharakterisieren, wurde die Expression von Notch-Rezeptoren und seinen -Ligandenwährend der Schwangerschaft untersucht.Methoden:Plazentares Gewebe aus dem 1. und 3. Trimester wurde mittels konventioneller undrealtime RT-PCR sowie Durchflusszytometrie und Immunohistochemie untersucht,um die Hypothese der sequentiellen Aktivierung der Notch-Rezeptoren- und ihrer-Ligandenfamilie zu testen. Zur Spezifizierung der exakten Lokalisation wurdenFärbungen mit Plazentagewebeschnitten mit CD31, Vimentin, Cytokeratin7 undCD68 durchgeführt.Ergebnisse:Die Rezeptoren Notch2, -3, -4 und die Liganden Jagged1 und Delta4 sind aufmRNA- und Proteinebene in den frühen wie auch in den späten Plazentennachweisbar. Jagged2, Delta1 und Notch1 sind auf Proteinebene nachweisbar,wobei Jagged2 und Delta1 auch auf mRNA-Ebene nachgewiesen wurden. KeinNachweis auf mRNA-Ebene war für Notch1 zu erbringen. Überraschenderweise wardie Expression aller Notch-Rezeptoren und -Liganden nicht ausschließlich imGefäßsystem zu finden. Eine starke Jagged1 Expression wurde in Endothelzellengroßer Gefäße gesehen, was mit der bereits bekannten Rolle von Notch und Jaggedin der Differenzierung zwischen Arterie und Vene im Einklang steht. Weiterhinwurden Notch1, Delta1 und -4 in Endothelzellen lokalisiert. Die hauptsächlicheExpression von Jagged2 konnte den Stromazellen zugeordnet werden. Notch2 bis -4sind vorwiegend in den Hofbauer-Zellen, die häufig gefäßnah im Zottenstromaliegen, festzustellen. Diese Ergebnisse waren in frühen wie auch in späten Plazentenzu sehen. Die Befunde wurden anhand von aus Plazenten isolierten Zellen verifiziert.Notch-Rezeptoren und ihre Liganden sind ein Beispiel für die Kommunikationzwischen Trophoblast-, Stroma- und Endothelzellen und geben aufgrund ihresVerteilungsmusters Hinweise auf eine enge Zell-Zell-Interaktion im Rahmen derplazentaren Vaskulo- und Angiogenese.
OBJECTIVES: Vascular development in the placenta is important for anuncomplicated pregnancy and the development of a healthy fetus. In thedifferentiation of blood vessels notch receptors and ligands have been implicated toplay an essential role shown by several knock-out mouse models. To furthercharacterize the process of human placental vasculo- and angiogenesis weinvestigated the expression pattern of the notch receptors and their ligands duringpregnancy.METHODS: Conventional PCR, RT-PCR, flow cytometric analysis andimmunohistochemistry were performed in early (6-12 weeks of gestation) and lateplacenta (37-41 w.o.g.) to test the hypothesis of a sequential activation of the notchreceptorand ligand family. To specify the exact localisation immunohistochemistry ofplacental tissue with CD31, vimentin, cytokeratin and CD68 were done.RESULTS: The receptors notch2, -3, -4 and the ligands jagged1 and delta4 werepresent on mRNA and protein levels either in early and late placenta. Jagged-2,delta1, and notch1 were detected on protein level whereas jagged2 and delta1 wereobserved as well on mRNA level. Notch1 mRNA was not detected. Surprisingly theprotein expression was not to be found exclusively in the endothelium. A strongjagged1 expression was found in the endothelium of larger vessels supporting a rolein differentiating between artery and venule. Additionally, notch1, delta1 and -4 werefound in endothelial cells. The main expression of jagged2 was localized to stromalcells. Notch2, -3 and -4 were localized in Hofbauer Cells preferably adjoining bloodvessels. These results were shown in early and late placenta and verified on isolatedcells of the placenta. Notch receptors and their ligands are an example ofcommunication between trophoblast, stroma- and endothelial cells. Their distributionpattern indicates a strong cell-cell interaction in the process of placental vasculo- andangiogenesis.