Wirksame bakterielle Provokatoren des Immunsystems von Manduca sexta sind neben Escherichia coli und Bacillus megaterium auch Zellwandmaterial und Peptidoglukanfragmente <
10 kDa von Micrococcus luteus. Die Hämolymphe von unbehandelten M. sexta-Larven weist unterschiedliche z. T. ausreichende bakteriolytische Aktivitäten auf, um Bakterien mit Peptidoglukan des Lys-Typs sehr schnell zu lysieren.
B. megaterium wurde sowohl von Plasmatozyten als auch von Granulären Zellen der M. sexta-Larven phagozytiert. Kurz nach der Injektion von B. megaterium bildeten sich zunächst Aggregate aus Bakterien und überwiegend Plasmatozyten, aber auch Granuläre Zellen waren beteiligt. Plasmatozyten waren in solchen Fällen kaum noch frei zirkulierend zu finden. Im Laufe der Zeit erhöhte sich die Zahl der freien Plasmatozyten wieder.Darüber hinaus wurden durch Affinitätspräzipitation Hinweise für das Vorhandensein von Bindungsproteinen für Gram-positive Bakterien, mögliche peptidoglycan recognition proteins (PGRPs), in der zellfreien Hämolymphe von M. sexta-Larven gefunden. Sie weisen ein relatives Molekulargewicht von ca. 20 k auf.
Mittels des Screenings von cDNA-Expressionsbanken aus Hämozyten bzw. Fettkörpern von induzierten M. sexta-Larven mit monoklonalen Antikörpern (gegen M. sexta-Hämozyten) wurden Klone detektiert, die für Sequenzen eines neuen M. sexta-Annexin IX bzw. Annexin B9 kodieren. Es weist eine große Ähnlichkeit auch bezüglich der Struktur des Gens mit dem bereits bekannten Annexin IX von Bombyx mori auf. Es liegt ebenfalls mit drei Isoformen vor, die sich in einem kurzen 16 Aminosäuren langen C-terminalen Stück unterscheiden. Die drei Isoformen entstehen vermutlich aus einem einzigen Gen durch alternatives Spleißen der C-terminalen Region (alternative 3 -Spleißstellen). Annexin IX konnte immunhistologisch sowohl im Fettkörper als auch in Hämozyten, nicht jedoch in der Hämolymphe von M. sexta-Larven nachgewiesen werden. Das relative Molekulargewicht liegt bei ca. 33 34 k. Ein Signalpeptid liegt nicht vor. Es konnten gleichwohl verschiedene Domänen bzw. Motive in der Aminosäuresequenz detektiert werden: N-Glykosylierungs-, Myristylierungs- und verschiedene Phosphorylierungsmotive, die für Annexine typischen Annexin-Domänen und eine Calciumbindungsstelle sowie ein KGD-Motiv.
Im Rahmen eines EST-Projekts der Hämozyten-cDNA-Bank aus M. sexta konnten verschiedene Sequenzen ermittelt werden, die Proteine kodieren, die am Immungeschehen und an der Individualentwicklung beteiligt sind. Sie kodieren außerdem Strukturproteine, Enzyme und Proteine, die an Nukleinsäuren binden. Zu einigen der EST-Squenzen konnten keine vergleichbaren Sequenzen bzw. nur solche mit geringer Übereinstimmungswahrscheinlichkeit in Datenbanken gefunden werden, so dass hier das Potenzial für Sequenzen neuer noch nicht entdeckter Protein bei M. sexta liegt.
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