Isolierung und Anreicherung der enteroendokrinen K-Zellen aus Rattendarmmucosa
dc.contributor.author | Maaß, Jutta | |
dc.date.accessioned | 2023-06-12T08:04:02Z | |
dc.date.available | 2000-02-09T23:00:00Z | |
dc.date.available | 2023-06-12T08:04:02Z | |
dc.date.issued | 1999 | |
dc.description.abstract | 1. Ziel und Gegenstand der Untersuchung Die enteroendokrinen K-Zellen sind geeignete Kandidaten zur Herstellung von b-Ersatzzellen zur Therapie des Diabetes mellitus Typ I. Daher sollten sie - amModell der Ratte - lokalisiert, isoliert und angereichert werden. Abschließend sollte die Glucose-Stimulierbarkeit der entstandenen K-Zellsuspension überprüftwerden. 2. Untersuchungsmethoden Die K-Zellen wurden sowohl entlang des gesamten Darms als auch entlang der Villus-Krypt-Achse immunhistochemisch durch Immunfluoreszenzfärbungen vonGefriergewebeschnitten und radioimmunologisch u.a. durch quantitative Messung des K-Zellproduktes Glucose-dependent Insulinotropic Polypeptide (GIP)aus Proben, die durch spezielle Schab- und Ausschütteltechniken gewonnen worden waren, mittels Radioimmunoassay lokalisiert. Anschließend wurdenMethoden zur Isolation und Anreicherung der K-Zellen entwickelt. Zur Isolation wurde der Darm kleingeschnitten und in einem hyperosmolaren,natriumcitrathaltigen Puffer inkubiert, mit dem Darmzellen schonend aus dem Zellverband gelöst werden konnten. Anschließend wurden die K-Zellen durch einhochspezifisches, immunomag-netisches Verfahren (Dynabeads, Dynal, Hamburg) stark angereichert und die Glucosestimulierbarkeit der entstandenenK-Zellsuspension überprüft. 3. Ergebnisse der Untersuchung Sowohl über die gesamte Darmlänge als auch innerhalb der Villus-Krypt-Achse existiert ein Verteilungsgradient: die Anzahl der K-Zellen nimmt vomproximalen Jejunum zum Ileum und von den Villi zu den Krypten hin ab. Mit dem hier entwickelten Verfahren konnten K-Zellen schonend isoliert und effektiv angereichert werden. Im Vergleich zu bisher von anderen Arbeitsgruppenmittels Elutriation durchgeführten Anreicherungsversuchen konnten durch das immuno-magnetische Verfahren mit Dynabeads K-Zellsuspensionen in einer mehrals doppelt so hohen Reinheit gewonnen werden. Es konnte gezeigt werden, daß die durch Anreicherungsversuche gewonnenen K-Zellsuspensionen auf eine Glucosestimulation (20 mmol/l) mit derAusschüttung ihres Zellprodukte Glucose-dependent Insulinotropic Polypeptide (GIP) reagieren. Damit ist die Grundlage für die weiteren Versuche zur Herstellung von b-Ersatzzellen aus enteroendokrinen K-Zellen gelegt. | de_DE |
dc.identifier.uri | http://nbn-resolving.de/urn:nbn:de:hebis:26-opus-2114 | |
dc.identifier.uri | https://jlupub.ub.uni-giessen.de//handle/jlupub/17442 | |
dc.identifier.uri | http://dx.doi.org/10.22029/jlupub-16820 | |
dc.language.iso | de_DE | de_DE |
dc.rights | In Copyright | * |
dc.rights.uri | http://rightsstatements.org/page/InC/1.0/ | * |
dc.subject.ddc | ddc:570 | de_DE |
dc.title | Isolierung und Anreicherung der enteroendokrinen K-Zellen aus Rattendarmmucosa | de_DE |
dc.type | doctoralThesis | de_DE |
dcterms.dateAccepted | 1999-12-18 | |
local.affiliation | FB 09 - Agrarwissenschaften, Ökotrophologie und Umweltmanagement | de_DE |
local.opus.fachgebiet | Haushalts- und Ernährungswissenschaften - Ökotrophologie | de_DE |
local.opus.id | 211 | |
local.opus.institute | Institut für Klinische Chemie und Pathobiochemie | de_DE |
thesis.level | thesis.doctoral | de_DE |
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