Die Expression von Cyclin D2 in männlichen Keimzellen normaler und pathologischer Differenzierung

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Es ist bekannt, dass Cycline vom D-Typ als Regulatoren des Zellzyklus den Übergang von der frühen G1-Phase in die S-Phase steuern und so die mitotische Zellteilung einleiten. Eine Amplifikation des Cyclin D2-Gens und eine Überexpression des Cyclin D2-Proteins konnte aufgrund früherer Studien nicht nur in invasiven Keimzelltumoren (Seminomen und embryonalen Karzinomen) sondern auch in präinvasiven CIS-Läsionen nachgewiesen werden. Frühere Befunde an Cyclin D2-defizienten männlichen Mäusen und wenige immunhistochemische Daten vom adulten humanen Hoden lassen vermuten, dass Cyclin D2 nicht nur eine wichtige Rolle in der Pathogenese testikulärer Keimzelltumoren spielt, sondern auch für die normale Hodenentwicklung und Spermatogenese im adulten Hoden essentiell sein kann.Ziel der vorliegenden Studie war der Vergleich der Cyclin D2-Expression im normalen adulten Hoden, in CIS-Läsionen und Seminomen. Dazu wurde das Vorkommen von Cyclin D2-mRNA und -Protein im adulten humanen Hoden mit normaler Spermatogenese und in verschiedenen Formen testikulärer Tumore mittels Immunhistochemie, Western Blot und in situ Hybridisierung am Gewebehomogenat untersucht. Zudem kam als äußerst sensitive Methode die Reverse Transkriptase Polymerasekettenreaktion (RT-PCR) an einzelnen Keimzellpopulationen zur Anwendung, die mittels Laser Cell Mikrodissektion (LCMD) isoliert wurden. Eine Überexpression von Cyclin D2 in präinvasiven CIS-Läsionen und Seminomen zeigte sich auf Proteinebene immunhistochemisch und mithilfe des Western Blots sowie auf RNAEbene mittels in-situ Hybridisierung. Der Western Blot belegte das Cyclin D2-Vorkommen auch im adulten Hoden. Darüber hinaus war durch Isolierung testikulärer Zellprofile mittels LCMD kombiniert mit hochsensitiver RT-PCR der Nachweis von Cyclin D2 in sämtlichen Keimzellstadien des Humanhodens von Spermatogonien über Spermatozyten und runden Spermatiden bis hin zu elongierten Spermatiden möglich. Während Myofibrozyten und Sertoli-Zellen keine Signale ergaben, war Cyclin D2-mRNA in interstitiellen Leydigzellen nachweisbar. Die Detektion einer Überexpression von Cyclin D2 in präinvasiven CISLäsionen und Seminomen bestätigt frühere Resultate. Die vorliegenden Nachweise einer Cyclin D2-Expression in sämtlichen Keimzellstadien des normalen Hodens deuten auf neue von der Proliferation unabhängige Funktionen des Cyclin D2 in der Spermatogenese des adulten humanen Hodens hin.

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