Diese Arbeit beschäftigt sich mit dem Hepatitis C Virus (HCV), welches spezifisch die Leber befällt und bedeutsamster Auslöser für die chronische Hepatitis ist. Es wurde gezeigt, dass Nukleotid-Insertionen innerhalb der HCV-5´-UTR die microRNA-(miR)-122-vermittelte Stimulierung der Translation reduzieren. Zudem wurde untersucht, ob mittels Sucrose-Dichtegradienten-Ultrazentrifugation ein Einfluss der miR-122 auf die Bildung der Translations-Initiationskomplexe nachgewiesen werden kann. Das Hepatitis C Virus (HCV) wird in die Familie der Flaviviridae klassifiziert und ist Auslöser der NonA-NonB-Hepatitis. Als einzelsträngiges RNA-Virus mit Positiv-Orientierung kann es intrazellulär direkt translatiert werden, gleichwohl es nicht capabhängig, sondern vermittelt über die HCV-5´-IRES translatiert wird. Das Genom enthält einen offenen Leserahmen (ORF) und kodiert für ein einziges Polyprotein, welches co- und posttranslational in Struktur- und Nicht-Struktur-Proteine prozessiert wird. Der ORF wird flankiert von 5´-UTR und 3´-UTR. Die 5´-UTR ist unter den HCVIsolaten hochkonserviert und beinhaltet unter anderem zwischen den Stem-Loops I und II die beiden miR-122-Bindestellen. Die leberspezifische miR-122 stimuliert die HCV-Translation. Das Einfügen von Nukleotiden zwischen zweiter miR-122-Bindestelle und Stem-Loop II der HCV-5´-UTR zeigt eine signifikante Reduktion der Stimulierung der Translation durch miR-122 in HuH-7-Zellen, HuH-7.5-Zellen sowie unter Verwendung von d(T)-miR-122. Die Stimulierung bleibt in sämtlichen Versuchsreihen bei einer Insertion von 20 Nukleotiden komplett aus. Dieses Ergebnis zeigt, dass der Abstand zwischen miR-122-Bindestellen und der HCV-IRES für die Funktionalität der Stimulation der HCVTranslation durch miR-122 wichtig ist. Zudem wurde in dieser Arbeit die Sucrose-Dichtegradienten-Ultrazentrifugation für HuH-7-Zellen optimiert und mit dieser Methode der Einfluss der miR-122 auf die Bildung der Translations-Initiationskomplexe untersucht. Es wurde nachgewiesen, dass die miR-122 keinen Einfluss auf den Steady-State-Level der HCV-Translation ausübt.
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