Aufgrund der Genomstruktur könnten TTV und verwandte Viren der Virusfamilie der Circoviridae zugerechnet werden. Für die Einteilung in die Familie der Circoviridae erscheint jedoch die in der bisherigen Literatur angegebene Größe von 30-50nm als sehr groß gegenüber anderen Circoviren mit Größen zwischen 12 und 26,5 nm. Die Dichte und der Stokes`sche Durchmesser von TTV wurden in dieser Arbeit eingehend untersucht.
Zur Überprüfung der Dichte wurden mehrere Ultrazentrifugationen mit TTV-positivem Plasma durchgeführt und die DNA mittels einer vorher etablierten LightCycler PCR gemessen. Die dadurch erhaltene Cäsiumchloriddichte von 1,312 +/- 0,013 g/ml stimmt mit den Literaturwerten von 1,31 bis 1,35 g/ml überein. Circoviren haben jedoch mit 1,33 bis 1,37 g/ml höhere Dichten. Dies spricht für einen höheren Proteingehalt der TTV-Partikel, z.B. durch gebundene Antikörper.Mit Hilfe der Fraktionen, die nach Ultrazentrifugation die höchste TTV-DNA-Konzentration aufwiesen, wurde mittels Größenausschlußchromatographie (GAC) der Stokes`sche Durchmesser gemessen. Die Virus-Partikel wurden zum einen über ihr Genom durch die Light-Cycler PCR, und in einem zweiten Versuch über eine konventionelle PCR, gemessen. Die dabei ermittelten Werte von 37 bis 52 nm stimmten im ersten Versuch, dessen DNA mittels LightCycler PCR nachgewiesen wurde, mit den in der Literatur veröffentlichten Werten von 30-50 nm überein. Im zweiten Versuch, dessen DNA anhand der konventionellen PCR ermittelt wurde, konnte eine weitere Partikelart im Größenbereich zwischen 17 und 22 nm nachgewiesen werden, welche freien Circoviren entsprechen könnte.
Es stellte sich demnach die Frage, ob der relativ große Durchmesser und die relativ große Dichte der TTV-Partikel durch das Vorhanden sein von gebundenen Antikörpern zu erklären seien.
Um diese Frage zu beantworten wurde eine Immunpräzipitation mit Dyna-Beads durchgeführt, welche mit Antikörpern gegen den Fc-Teil humaner Antikörper beladen waren. Etwa die Hälfte der Partikel enthielt humanes IgG.
Die Resultate dieser Arbeit wiesen darauf hin, daß TTV im menschlichen Serum zum großen Teil als Antigen-Antikörper-Komplexe vorliegen und die TTV-Partikel in freier Form einen Durchmesser von rund 20 nm haben, wie es für ein Mitglied der Circoviridae zu erwarten ist.
Verknüpfung zu Publikationen oder weiteren Datensätzen
