Diese Arbeit beschäftigt sich mit den Grundlagen der Isolation, Charakterisierung undDifferenzierung von humanen fettabgeleiteten Stammzellen. Für die Gewinnung derhumanen Stammzellen für die experimentellen Untersuchungen wurden eigensentwickelte Methoden entworfen und ausführlich beschrieben, die eine hohe Stammzell-Ausbeute aus dem Fettgewebe gewährleisten. Die erarbeiteten Methoden sollen alszukünftige Anleitung für alle weiteren Stammzellisolationen für die experimentellenArbeiten mit den Stammzellen dienen.
Neben der Etablierung sämtlicher Zellkulturmethoden für die Stammzellen wurdenausführliche Wachstumsmessungen durchgeführt, um die Proliferationseigenschaften derStammzellen genauer zu beschreiben. Im Weiteren konnte durch den Nachweis vonStammzellmarkern die isolierten Stammzellen mit immunzytochemischen Methoden amkonfokalen Mikroskop und in der FACS Analyse eindeutig charakterisiert werden.
In dieser Arbeit gelang es erstmals, eine spontane endotheliale Differenzierung deradipogenen Stammzellen durch den eindeutigen Nachweis von verschiedenenspezifischen endothelialen Markern durch immunzytochemische Methoden amkonfokalen Mikroskop und durch die FACS-Analyse zu zeigen. Im Konfrontations-Modell der Stammzellen mit einem Tumor-Sphäroid konnten zudem endothelialeDifferenzierungen der Stammzellen im Tumor induziert werden.
Im Weiteren konnten erstmals spontane Calcium-Oszillationen bei den adipogenenStammzellen nachgewiesen werden, die ausführlicher auf ihre Beeinflussung durch extraundintrazelluläre Substanzen analysiert wurden. Es konnte gezeigt, werden dassextrazelluläre Calcium-Ionen Einflüsse auf die Oszillationen haben. Zu dem ließen sichdie Oszillationen durch Inkubation der Zellen mit SKF 96365 und BAPTA vonintrazellulärer Seite inhibieren, was auf die Notwendigkeit sowohl extrazellulärenCalciums, als auch Calcium aus intrazellulären Speichern hinweist.
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